Efecto inhibitorio de un extracto acuoso de las hojas de Allophylus cominia (L) Sw sobre las proteínas tirosina fosfatasa 1B y dipeptidil peptidasa IV / Inhibitory effect of Allophylus cominia (L) Sw leaves aqueous extract on tyrosine phosphatase 1B and dipeptidyl peptidase IV proteins

Introducción: Allophylus cominia (L.) Sw es una planta medicinal cubana usada por la medicina tradicional para el tratamiento de la diabetes, cuyo mecanismo de acción es desconocido. Objetivo: evaluar el efecto del extracto acuoso de hojas de A. cominia (L.) Sw y sus fracciones sobre la proteína tirosina fosfatasa 1B (PTP1B) y dipeptidil peptidasa IV (DPPIV) como diana terapéuticas para el tratamiento de la diabetes tipo 2. Métodos: el extracto acuoso de hojas de A. cominia fue fraccionado sucesivamente con mezclas de solventes orgánicos, incrementando la polaridad, para obtener diez fracciones. El extracto y sus fracciones fueron evaluados para su posible actividad antidiabética sobre diana terapéuticas de diabetes tipo 2: PTP1B y DPPIV. Se realizaron ensayos de inhibición enzimática y la actividad inhibitoria se calculó a partir de los valores de fluorescencia, empleando longitudes de onda de excitación y de emisión de 360 nm y 460 nm respectivamente. Resultados: el extracto acuoso de A. cominia inhibió la actividad enzimática de PTP1B y DPPIV de manera dependiente de la concentración, con valores de CI50 de 0,69 µg/mL y 344,3 µg/mL respectivamente. Varias fracciones se detectaron como potentes inhibidores de PTP1B. Las fracciones más polares AcF9 y AcF10 fueron las más activas, y mostraron valores de CI50 de 4,4 µg/mL y 3,8 µg/mL respectivamente. Las fracciones mostraron una ligera inhibición de DPPIV, y las más activas resultaron AcF6, AcF9 y AcF10, con valores de porcentajes de inhibición de 52,0 por ciento, 39,0 por ciento y 40,0 por ciento respectivamente. Conclusiones: el extracto acuoso de A. cominia y sus fracciones polares (AcF9 y AcF10) tienen propiedades antidiabéticas in vitro y son candidatos promisorios para el desarrollo de nuevos medicamentos con actividad inhibidora de PTP1B y DPPIV para el tratamiento de la diabetes tipo 2(AU)

INTRODUCTION: Allophylus cominia (L.) Sw is a Cuban medicinal plant used by traditional medicine for the treatment of diabetes with unknown mechanisms of action. OBJECTIVE: to evaluate the effect of Allophylus cominia (L.) Sw leaves aqueous extract and its fractions on protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) and dipeptidyl peptidase IV (DPPIV) enzymatic activity, as therapeutic targets of type 2 diabetes. METHODS: the aqueous extract of A. cominia leaves was successively partitioned with organic solvents mixtures, thus increasing polarity in order to obtain ten fractions. The extract and its fractions were tested for their possible antidiabetic activity on therapeutic targets of type 2 diabetes: PTP1B and DPPIV. The enzymatic inhibition assays were performed and the inhibitory activity was calculated with the fluorescence values using an excitation wavelength of 360 nm and an emission wavelength of 460 nm. RESULTS: the aqueous extract from A. cominia inhibited the enzymatic activity of PTP1B and DPPIV according to the concentration, being IC50 values equal to 0.69 µg/mL and 344.3 µg/mL, respectively. Several fractions were detected as potent PTP1B inhibitors. The most polar fractions AcF9 and AcF10 were more active, showing IC50values of 4.4 µg/mL and 3.8 µg/mL respectively. The fractions showed a slight DPPIV inhibition, being fractions AcF6, AcF9 and AcF10 the most active, exhibiting inhibition percentages of 52.0 percent, 39.0 percent and 40.0 percent respectively. CONCLUSIONS: A. cominia aqueous extract and its polar fractions (AcF9 and AcF10) have antidiabetic properties in vitro and are promissory candidates for development of new drugs with inhibitory activity of PTP1B and DPPIV for type 2 diabetes treatment(AU)

Efecto inhibitorio de un extracto acuoso de las hojas de Allophylus cominia (L. ) Sw sobre las proteínas tirosina fosfatasa 1B y dipeptidil peptidasa IV / Inhibitory effect of Allophylus cominia (L. ) Sw leaves aqueous extract on tyrosine phosphatase 1B and dipeptidyl peptidase IV proteins

Introducción: Allophylus cominia (L.) Sw es una planta medicinal cubana usada por la medicina tradicional para el tratamiento de la diabetes, cuyo mecanismo de acción es desconocido. Objetivo: evaluar el efecto del extracto acuoso de hojas de A. cominia (L.) Sw y sus fracciones sobre la proteína tirosina fosfatasa 1B (PTP1B) y dipeptidil peptidasa IV (DPPIV) como diana terapéuticas para el tratamiento de la diabetes tipo 2. Métodos: el extracto acuoso de hojas de A. cominia fue fraccionado sucesivamente con mezclas de solventes orgánicos, incrementando la polaridad, para obtener diez fracciones. El extracto y sus fracciones fueron evaluados para su posible actividad antidiabética sobre diana terapéuticas de diabetes tipo 2: PTP1B y DPPIV. Se realizaron ensayos de inhibición enzimática y la actividad inhibitoria se calculó a partir de los valores de fluorescencia, empleando longitudes de onda de excitación y de emisión de 360 nm y 460 nm respectivamente. Resultados: el extracto acuoso de A. cominia inhibió la actividad enzimática de PTP1B y DPPIV de manera dependiente de la concentración, con valores de CI50 de 0,69 μg/mL y 344,3 μg/mL respectivamente. Varias fracciones se detectaron como potentes inhibidores de PTP1B. Las fracciones más polares AcF9 y AcF10 fueron las más activas, y mostraron valores de CI50 de 4,4 µg/mL y 3,8 µg/mL respectivamente. Las fracciones mostraron una ligera inhibición de DPPIV, y las más activas resultaron AcF6, AcF9 y AcF10, con valores de porcentajes de inhibición de 52,0 por ciento, 39,0 por ciento y 40,0 por ciento respectivamente. Conclusiones: el extracto acuoso de A. cominia y sus fracciones polares (AcF9 y AcF10) tienen propiedades antidiabéticas in vitro y son candidatos promisorios para el desarrollo de nuevos medicamentos con actividad inhibidora de PTP1B y DPPIV para el tratamiento de la diabetes tipo 2(AU)

Introduction: Allophylus cominia (L.) Sw is a Cuban medicinal plant used by traditional medicine for the treatment of diabetes with unknown mechanisms of action. Objective: to evaluate the effect of Allophylus cominia (L.) Sw leaves aqueous extract and its fractions on protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) and dipeptidyl peptidase IV (DPPIV) enzymatic activity, as therapeutic targets of type 2 diabetes. Methods: the aqueous extract of A. cominia leaves was successively partitioned with organic solvents mixtures, thus increasing polarity in order to obtain ten fractions. The extract and its fractions were tested for their possible antidiabetic activity on therapeutic targets of type 2 diabetes: PTP1B and DPPIV. The enzymatic inhibition assays were performed and the inhibitory activity was calculated with the fluorescence values using an excitation wavelength of 360 nm and an emission wavelength of 460 nm. Results: the aqueous extract from A. cominia inhibited the enzymatic activity of PTP1B and DPPIV according to the concentration, being IC50 values equal to 0.69 μg/mL and 344.3 μg/mL, respectively. Several fractions were detected as potent PTP1B inhibitors. The most polar fractions AcF9 and AcF10 were more active, showing IC50 values of 4.4 µg/mL and 3.8 µg/mL respectively. The fractions showed a slight DPPIV inhibition, being fractions AcF6, AcF9 and AcF10 the most active, exhibiting inhibition percentages of 52.0 percent, 39.0 percent and 40.0 percent respectively. Conclusions: A. cominia aqueous extract and its polar fractions (AcF9 and AcF10) have antidiabetic properties in vitro and are promissory candidates for development of new drugs with inhibitory activity of PTP1B and DPPIV for type 2 diabetes treatment(AU)

Inhibitory effect of Persea americana Mill leaf aqueous extract and itsfractions on PTP1B as therapeutic target for type 2 diabetes / Efecto inhibidor del extracto acuoso de hojas de Persea americana Mill y sus fracciones sobre PTP1Bcomo diana terapéutica para la diabetes tipo 2

Persea Americana Mill (Lauraceae), is a popular plant in Cuba due to its nutritional and medicinal properties. The fruit of the plant is commonly known as avocado. The leaves of Persea americana Mill have been popularly used in the treatment of diabetes incountries in Latin America and Africa. The present study is aimed to explore one of the underlying mechanisms that mediate the antidiabeticefficacy of Persea americana Mill. The aqueous extract from the leaves of the plant and its fractions were evaluated on the inhibitory activity of the protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) as target of type 2 diabetes. The results revealed that aqueous extract from Pamericana inhibited the enzymatic activity of PTP1B in an extract concentration dependent manner, resulting mainly active the most polarfraction. The present research demonstrated that aqueous extract from P americana and polar fraction (PaF10) have promissory antidiabetic properties mediated by PTP1B, which is a relevant mechanism involved on insulin resistance in type 2 diabetes.

Persea americana Mill. (Lauraceae), es una planta popular en Cuba, debido a sus propiedades nutricionales y medicinales. El fruto de la planta se conoce comúnmente como aguacate. En la etnomedicina las hojas de Persea americana Mill. se han utilizadopopularmente en el tratamiento de la diabetes en varios países en Latinoamérica y África. El presente estudio tuvo el objetivo de explorar laeficacia antidiabética y el mecanismo subyacente, de las hojas de Persea americana. El extracto acuoso de las hojas de la planta y sus fracciones, se evaluaron en un blanco terapéutico de interés en la de diabetes tipo 2: actividad enzimática de la proteína tirosina fosfatasa 1B (PTP1B). Los resultados revelaron que el extracto acuoso de P americana inhibe la actividad enzimática de la enzima PTP1B en una manera dependiente de la concentración, resultando más activa la fracción de mayor polaridad. La presente investigación demostró que elextracto acuoso de P americana y su fracción polar (PaF10), poseen efecto antidiabético promisorio, debido al efecto inhibitorio de PTP1B, mecanismo relevante en la insulino resistencia en la diabetes tipo2.

Evaluación del efecto antiinflamatorio de un extracto orgánico de Allophylus cominia (L) Sw. sobre la actividad de COX-2 y FLA-2s / Evaluation of the antiinflammatory effect of an organic extract of Allophylus cominia (L) Sw. on COX-2 and sPLA-2 activity

Allophylus cominia (L) Sw (Sapindaceae), is one of the most popular Cuban medicinal plant. The aimed of this study was to explore, if the antidiabetic organic extract has also anti-inflammatory effect, considering that inflammation is correlationated with diabetes. It was evaluated in vitro inhibitory activity of chloroform extract of leaves on cyclooxygenase-2 (COX-2) and secreted phospholipase A2 (sPLA-2), which are important cellular mediators in the signaling cascade of the inflammatory process. The extract studied shown inhibitory activity on COX-2, while not shown on FLA-2s. This study provides direct evidence of the activity of A. cominia on mechanisms related to anti-inflammatory effects involving the eicosanoid cascade.

Allophylus cominia (L) Sw (Sapindáceas) es una de las plantas medicinales más afamadas de la medicina tradicional en Cuba. El objetivo de este estudio fue explorar si el extracto orgánico con actividad antidiabética tenía también efecto de tipo antiinflamatorio, considerando que la inflamación es un evento relacionado con la diabetes. En tal sentido se evaluó in vitro la actividad inhibitoria del extracto clorofórmico de las hojas de Allophylus cominia (L) Sw sobre cicloxigenasa-2 (COX-2) y fosofolipasa A2 secretada (FLA-2s), las cuales constituyen importantes mediadores celulares en la cascada de señalización del proceso inflamatorio. El extracto estudiado exhibió actividad inhibitoria sobre COX-2, mientras que no la mostró sobre FLA-2s. Este trabajo brinda evidencias directas de la actividad de A. cominia sobre mecanismos vinculados al efecto antinflamatorio que involucran la cascada de eicosanoides.

Validación de un método in vivo para evaluar la actividad diurética / Validation of an in vivo method to assess the diuretic activity

Con el objetivo de proporcionar un modelo farmacológico in vivo para determinar la actividad diurética de plantas medicinales, se prepararon extractos acuosos a partir de la droga seca de 8 plantas con actividad diurética atribuida por la medicina tradicional cubana, pero que carecían de validación experimental. Se distribuyeron al azar 88 ratas machos Sprague-Dawley a razón de 8 animales por grupo: controles positivos (furosemida 20 mg/kg e hidroclorotiazida 10 mg/kg); control negativo (NaCl 0,9 por ciento) y 8 grupos tratados con extractos acuosos de plantas que se administraron por vía oral a dosis de 400 mg/kg, sobre la base de la determinación de los sólidos totales. La dosis fue completada con solución salina fisiológica para lograr una sobrecarga hidrosalina con un volumen total de administración constante de 40 mL/kg de peso vivo. Las ratas se colocaron en jaulas metabólicas y se midieron los volúmenes de orina excretados a las ¢, 1, 2, 3, 4, 5 y 6 h posadministración y las concentraciones de electrolitos (Na+ y K+) en la orina total colectada a las 24 h. Se observó que todos los grupos tratados incrementaron el volumen de orina en relación con el grupo control negativo. La excreción urinaria, acción y actividad diurética fueron mayores en los grupos experimentales: Persea americana Miller (similar a la furosemida) y Cassia alata L, Zanthoxylum fagara L. (similar a las tiazidas)(AU)

To supply a in vivo pharmacological model to determine the diuretic activity of medicinal plants, aqueous extracts were prepared from dry drug of 8 medicinal plants with diuretic activity attributed by the Cuban traditional medicine, but there was an experimental validation. Eighty Sprague-Dawley eight male rats were random distributed at a rate of eight rats by group: positive controls ( 20 mg/kg furosemide and 10 mg/kg hydrochlorothiazide); negative control (NaCI 0.9 percent) and 8 groups treated with aqueous extracts from plants supplied by oral route at doses of 400 mg/kg, on the base of determination of total solids. Dose was completed with physiological saline solution to achieve a hydrosaline overload with a total volume of constant administration of 40 mL/kg of weight lives. Rats were placed in metabolic cages measuring the volumes of urine extracted at ¢, 1, 2, 3, 4, 5 and 6 h post-administration and the electrolytes concentrations (Na+ and K+) in total urine collected at 24 h. It was noted that all the treated groups increased the urine volume in relation to negative control group. Urinary excretion, diuretic action and activity were higher in experimental groups: Persea Americana Miller (similar to Furosemide) and Cassia alata L, Zanthoxylum fagara L. (similar to thiazides)(AU)

Validación de un método in vivo para evaluar la actividad diurética / Validation of an in vivo method to assess the diuretic activity

Con el objetivo de proporcionar un modelo farmacológico in vivo para determinar la actividad diurética de plantas medicinales, se prepararon extractos acuosos a partir de la droga seca de 8 plantas con actividad diurética atribuida por la medicina tradicional cubana, pero que carecían de validación experimental. Se distribuyeron al azar 88 ratas machos Sprague-Dawley a razón de 8 animales por grupo: controles positivos (furosemida 20 mg/kg e hidroclorotiazida 10 mg/kg); control negativo (NaCl 0,9 por ciento) y 8 grupos tratados con extractos acuosos de plantas que se administraron por vía oral a dosis de 400 mg/kg, sobre la base de la determinación de los sólidos totales. La dosis fue completada con solución salina fisiológica para lograr una sobrecarga hidrosalina con un volumen total de administración constante de 40 mL/kg de peso vivo. Las ratas se colocaron en jaulas metabólicas y se midieron los volúmenes de orina excretados a las ¢, 1, 2, 3, 4, 5 y 6 h posadministración y las concentraciones de electrolitos (Na+ y K+) en la orina total colectada a las 24 h. Se observó que todos los grupos tratados incrementaron el volumen de orina en relación con el grupo control negativo. La excreción urinaria, acción y actividad diurética fueron mayores en los grupos experimentales: Persea americana Miller (similar a la furosemida) y Cassia alata L, Zanthoxylum fagara L. (similar a las tiazidas)

To supply a in vivo pharmacological model to determine the diuretic activity of medicinal plants, aqueous extracts were prepared from dry drug of 8 medicinal plants with diuretic activity attributed by the Cuban traditional medicine, but there was an experimental validation. Eighty Sprague-Dawley eight male rats were random distributed at a rate of eight rats by group: positive controls ( 20 mg/kg furosemide and 10 mg/kg hydrochlorothiazide); negative control (NaCI 0.9 percent) and 8 groups treated with aqueous extracts from plants supplied by oral route at doses of 400 mg/kg, on the base of determination of total solids. Dose was completed with physiological saline solution to achieve a hydrosaline overload with a total volume of constant administration of 40 mL/kg of weight lives. Rats were placed in metabolic cages measuring the volumes of urine extracted at ¢, 1, 2, 3, 4, 5 and 6 h post-administration and the electrolytes concentrations (Na+ and K+) in total urine collected at 24 h. It was noted that all the treated groups increased the urine volume in relation to negative control group. Urinary excretion, diuretic action and activity were higher in experimental groups: Persea Americana Miller (similar to Furosemide) and Cassia alata L, Zanthoxylum fagara L. (similar to thiazides)

Estudio etnobotánico de las plantas más utilizadas como diuréticas en la Provincia de Villa Clara, Cuba / Ethnobotany study of the most used diuretic plants in Province Villa Clara, Cuba

An ethnobotanic study was carried out combining methods and techniques characteristic of the qualitative and quantitative investigation, in 10 municipalities of Villa Clara province, Cuba. It was taken a heterogeneous sample of 250 people constituted for: experts of plants, herbalists and expert doctors in phytotherapy who identified the plants more used with these ends in the studied communities. The data obtained starting from the consent of informants, were analyzed by means of the index of use value (IVU) and the level of significant use (UST) of the Tradicional of the Medicine of the Island (TRAMIL). They registered 20 medicinal species contained in 14 botanical families and they met 8 plants with a bigger use level and a bigger IVU. 60 percent of the plants reported as diuretic lacked scientific validation, the rest of the identified species has been studied at preclinic level, although in its great majority they don't appear in the Cuban Pharmacopeia of Medicinal Plants neither they are authorized by the agency Cuban reguladora, Center for the State Control of the Quality of the Medications (CECMED). The documentation related with the uses of the medicinal plants in the study areas, reveal that the traditional knowledge continues deeply ingrained to the communities and the popular knowledge stays in the representative figures of the herbalists and the experts of plants. The present work intends to evaluate through the medical ethnobotany, the current state of the traditional knowledge on medicinal plants with diuretic activity attributed in several communities of Villa Clara province, Cuba.

Se realizó un estudio etnobotánico, combinando métodos y técnicas propias de la investigación cualitativa y cuantitativa, en 10 municipios de la provincia de Villa Clara, Cuba. La muestra definida incluyó a 250 personas (conocedores de plantas, yerberos y médicos expertos en fitoterapia), quienes identificaron las plantas más utilizadas con estos fines en las comunidades estudiadas. Los datos obtenidos a partir del consenso de informantes, fueron analizados mediante el índice de valor de uso (IVU) y el nivel de uso significativo (UST) de Tradicional of the Medicine of the Island (TRAMIL). Se registraron 20 especies medicinales agrupadas en 14 familias botánicas y se encontraron 8 plantas con un mayor nivel de uso y un mayor IVU. El 60 por ciento de las plantas reportadas como diuréticas carecían de validación científica, el resto de las especies identificadas han sido estudiadas a nivel preclínico, aunque en su gran mayoría no constan en la Farmacopea Cubana de Plantas Medicinales ni su uso con fines terapéuticos está autorizado por la agencia reguladora cubana: Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED). La documentación relacionada con los usos de las plantas medicinales en las áreas de estudio, revelan que el conocimiento tradicional continúa profundamente arraigado a las comunidades y se mantiene el saber popular en las figuras representativas del yerbero y los conocedores de plantas. El presente trabajo propone evaluar a través de la etnobotánica médica, el estado actual del conocimiento tradicional sobre plantas medicinales con actividad diurética atribuida en varias comunidades de la provincia de Villa Clara, Cuba.